在消毒和滅菌之前需要徹底清潔：所有其他條件保持不變，微生物數(shù)量越多，殺菌劑需要消滅所有微生物的時間越長。
斯波爾丁說明了這種關(guān)系，當(dāng)他采用相同的測試條件并證明需要30分鐘殺死10株萎縮芽孢桿菌（原枯草芽孢桿菌）孢子，但需要3小時才能殺死100,000株萎縮芽孢桿菌孢子。這加強(qiáng)了在消毒和滅菌之前對醫(yī)療器械進(jìn)行嚴(yán)格清潔的需要。減少必須通過細(xì)致清潔滅活的微生物數(shù)量，增加了根據(jù)標(biāo)簽使用殺菌劑時的安全范圍，并縮短了殺死整個微生物負(fù)荷所需的暴露時間。
滅菌劑對微生物的可及性：當(dāng)評估影響殺菌劑功效的因素時，還必須考慮微生物的位置。必須拆卸具有多個部件的醫(yī)療器械，并且諸如具有裂縫，接頭和通道的內(nèi)窺鏡之類的設(shè)備比平面設(shè)備更難以消毒，因為設(shè)備的所有部件的消毒劑的滲透更加困難。只有直接接觸殺菌劑的表面才會被消毒，因此必須沒有氣穴，并且設(shè)備必須在整個暴露期間完全浸沒。應(yīng)鼓勵制造商生產(chǎn)易于清潔和消毒的設(shè)備。