摘要：

  培育基是供微生物成長(zhǎng)、繁衍、代謝的混合養(yǎng)料。因?yàn)槲⑸锞哂胁灰粯拥酿B(yǎng)分類型，對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的請(qǐng)求也各不相同，加之試驗(yàn)和研討的意圖不一樣，所以培育基的品種許多，運(yùn)用的原料也各有差異，但從養(yǎng)分視點(diǎn)分析，培育基中通常富含微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、成長(zhǎng)素以及水分等。另外，培育基還應(yīng)具有適宜的pH值、必定的緩沖才干、必定的氧化復(fù)原電位及適宜的滲透壓。滅菌常用的辦法有化學(xué)試劑滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌和過(guò)濾除菌等。可根據(jù)不一樣的需求，選用不一樣的辦法，如培育基滅菌通常選用濕熱滅菌，空氣則選用過(guò)濾除菌。

關(guān)鍵字：滅菌  辦法  技能
   在醫(yī)學(xué)中微生物的殺滅叫滅菌；滅菌的結(jié)果是無(wú)菌，也就是說(shuō)指定樣品經(jīng)過(guò)一系列處理后不含任何微生物。例如手術(shù)器械的消毒進(jìn)程等。微生物的滅菌假如用加熱辦法與溫度有關(guān)外還和作用時(shí)刻有關(guān)。100度溫度下加熱30分?jǐn)[布時(shí)分根本上大多數(shù)微生物會(huì)被殺滅，可是細(xì)菌的芽孢卻破例，能耐高溫。
   在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，常選用物理、化學(xué)及生物的辦法，鏟除環(huán)境中的微生物，以堵截傳達(dá)路徑，維護(hù)易感人群，然后操控或消除流行癥?，F(xiàn)將有關(guān)術(shù)語(yǔ)介紹如下：
   消毒 (disinfection) 殺滅物體上病原微生物的辦法，稱為消毒。用于消毒的化學(xué)藥品稱消毒劑。常用濃度下的消毒劑，只對(duì)細(xì)菌繁衍體有用，對(duì)其芽胞則需進(jìn)步消毒劑濃度和延長(zhǎng)作用時(shí)刻才干殺滅。
   滅菌 (sterilization) 殺滅物體上所有微生物，包含細(xì)菌芽胞的辦法，稱滅菌。
   無(wú)菌 (asepsis) 物體中無(wú)活的微生物存在，稱為無(wú)菌。避免微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的辦法，稱為無(wú)菌操作或無(wú)菌技能。進(jìn)行微生物學(xué)試驗(yàn)、外科手術(shù)、換藥、打針時(shí)，均需嚴(yán)厲遵守?zé)o菌操作規(guī)定。
   防腐 (antisepsis) 避免或按捺微生物在物體中成長(zhǎng)繁衍的辦法，稱防腐。用于防腐的化學(xué)藥品稱防腐劑。運(yùn)用同一種化學(xué)藥品低濃度時(shí)為防腐劑，高濃度則為消毒劑。
清潔整理 (sanitation) 將微生物污染了的無(wú)生命物體外表復(fù)原為安全水平的處理進(jìn)程。例如醫(yī)院內(nèi)的病房、患者運(yùn)用過(guò)的用具、布類的清潔處理等。
一、物理消毒滅菌法
   物理消毒滅菌法是醫(yī)學(xué)實(shí)踐中常用的辦法，通常包含熱力、紫外線、輻射、超聲波和濾過(guò)除菌等。
(一)熱力滅菌法
    熱滅菌法 運(yùn)用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的悉數(shù)蛋白質(zhì)變性，酶活性不見(jiàn)，致使細(xì)胞逝世。通常有干熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。
   熱力能損壞微生物的蛋白質(zhì)和核酸，使蛋白質(zhì)變性凝結(jié)，核酸解鏈崩裂，然后致使其逝世。
   1.干熱滅菌法 直接運(yùn)用火焰將微生物燒死（如燒接種環(huán)、載玻片和試管口等）。不能用火焰滅菌的物品則運(yùn)用熱空氣滅菌,將物品放在烘箱中加熱到160～170℃,繼續(xù)90分鐘，此法適用于玻璃、金屬和木質(zhì)的器皿。
   (1)燃燒與燒灼 燃燒僅用于拋棄的被病原微生物污染的物品、廢物、人及動(dòng)物尸身等。燒灼用于微生物試驗(yàn)室的接種環(huán)、金屬器械、試管口、瓶口等的滅菌。
   (2)干烤 運(yùn)用干烤箱滅菌，通常需加熱**160℃～170℃經(jīng)2h，可到達(dá)滅菌的意圖。適用于玻璃器皿、瓷器、金屬物品等的滅菌。
   2.濕熱消毒滅菌法
   濕熱滅菌 以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。巴氏滅菌法就是濕熱滅菌，此法有兩種辦法，①低溫長(zhǎng)時(shí)刻處理：在61.7～62.8℃下處理30分鐘；②高溫短時(shí)刻處理：在71.6℃或略高溫度下處理15分鐘。在上述諸法中，以蒸氣加壓滅菌作用**佳，可用常壓蒸氣滅菌，也可在高壓蒸氣鍋中（通常運(yùn)用1千克/公分2）滅菌,其蒸氣溫度可達(dá)121℃,能將耐熱的芽孢在30分鐘內(nèi)悉數(shù)殺死。但對(duì)某些易被高壓損壞的物質(zhì)，如某些糖或有機(jī)含氮化合物，宜在0.6千克/公分2壓力下(110℃)滅菌15～30分鐘。
   (1)巴氏消毒法 法G**巴斯德創(chuàng)用而得名。shou要以較低溫度殺滅病原菌或特定微生物，而使物品中不耐熱成分不被損壞。此法有兩種：一種辦法是加熱61.1℃～62.8℃、30min；另一種辦法是加熱71.7℃、15～30s?，F(xiàn)在大家多用后種辦法對(duì)牛奶進(jìn)行消毒。
   (2)煮沸法 煮沸100℃、5～10min，可殺死細(xì)菌繁衍體。芽胞則需求煮沸1～2h。常用于打針器、食具與飲水的消毒。
   (3)流轉(zhuǎn)蒸氣法 用阿諾(Arnold)蒸鍋或普通蒸籠，加熱100℃、15～30min，可殺滅細(xì)菌的繁衍體。若將消毒后的物品放入37℃孵箱培育，使芽胞發(fā)育成繁衍體，次日再蒸一次，如此接連三次以上，可到達(dá)滅菌作用，這種辦法稱為間歇滅菌法。常用于不耐高溫的物品，如糖類、血清和雞蛋培育基等的滅菌。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
   (4)高壓蒸氣滅菌法 是一種敏捷而有用的滅菌辦法。運(yùn)用高壓蒸氣滅菌器，運(yùn)用加熱發(fā)生蒸氣，跟著蒸氣壓力不斷添加，溫度隨之添加，通常壓力在103.4kPa(適當(dāng)舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )時(shí)，器內(nèi)溫度可達(dá)121.3℃，保持15～30min，可殺滅包含芽胞在內(nèi)的所有微生物。此法常用于通常培育基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。
(二)紫外線與電離輻射
   1.日光與紫外線 日光消毒是**簡(jiǎn)略、經(jīng)濟(jì)的辦法，將患者的被褥、衣服、書(shū)報(bào)等在日光下曝曬數(shù)小時(shí)，可殺死外表的大多數(shù)微生物。日光中滅菌的成份shou要是紫外線。紫外線200～300nm時(shí)，具有滅菌作用，其間以265～266nm波長(zhǎng)的紫外線滅菌力**強(qiáng)。紫外線的滅菌原理，shou要是細(xì)菌DNA吸收紫外線后，一條鏈上相鄰的兩個(gè)嘧啶經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合構(gòu)成二聚體，然后攪擾了DNA的正常堿基配對(duì)，致使細(xì)菌逝世或變異。紫紅外線能透過(guò)石英，但不能穿過(guò)通常玻璃或薄紙，因此，紫外線只適用于物體外表及空氣的消毒。例如手術(shù)室、嬰兒室、流行癥房、無(wú)菌制劑室、微生物接種室的空氣消毒。
   2.電離輻射 X射線、γ射線和陰極射線等電離輻射，有較高的能量與穿透力，因此可發(fā)生較強(qiáng)的致死效應(yīng)。其機(jī)制在于發(fā)生游離基，損壞DNA。此法常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒；亦可用于中藥成藥和食品的消毒，而不損壞其化學(xué)成分和養(yǎng)分成分。
(三)超聲波
   超聲波是不被人耳感觸的高于 20千周/s的聲波。其滅菌機(jī)制shou要是它經(jīng)過(guò)水時(shí)發(fā)生空化作用，而損壞了細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的膠體狀體，使其胞膜、胞質(zhì)別離，胞壁及胞膜破碎致細(xì)菌繁衍體逝世。此法shou要用于粉碎細(xì)胞，以獲取細(xì)胞組分或制備抗原等。
(四)微波
   是一種波長(zhǎng)為 1mm到1m擺布的電磁波，稱微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬外表?，F(xiàn)在用于消毒的微波有2,450MHz與915MHz兩種，常用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無(wú)菌病室的食品用具及其它用品的消毒。
(五)濾過(guò)除菌
   濾過(guò)除菌是用濾菌器阻留過(guò)濾液體和氣體的細(xì)菌，以到達(dá)無(wú)菌的意圖。濾菌器富含微細(xì)小孔，只允許液體或氣體經(jīng)過(guò)，而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能經(jīng)過(guò)。常用濾菌器有蔡氏濾器、玻璃濾器、薄膜濾器及高效顆粒空氣濾器四種。shou要用于不耐熱的血清、抗毒素、生物藥品以及空氣等的除菌。
二、化學(xué)消毒法
   許多化學(xué)藥物都有按捺或殺滅微生物作用，按作用不一樣分為化學(xué)消毒劑和化學(xué)醫(yī)治劑兩類，用于消毒、防腐和醫(yī)治疾病。
(一)常用消毒劑的品種和使用
   具有殺死微生物的化學(xué)藥物稱消毒劑。消毒劑對(duì)人體有毒性作用，只能外用，不能內(nèi)服。shou要用于肌膚粘膜的傷口、器械、排泄物和周圍環(huán)境的消毒。消毒劑在低濃度時(shí)也可作防腐用，但防腐劑的關(guān)鍵是應(yīng)要對(duì)人體無(wú)毒性作用。消毒劑品種濃度與用處見(jiàn)表 13-1。
                       常用消毒劑的品種濃度與用處

(二)常用消毒劑的滅菌機(jī)制
   消毒劑滅菌原理通常有以下三方面：
   1.使菌體蛋白質(zhì)變性或凝結(jié) 例如醇類、醛類、酸堿類以及高濃度的重金屬鹽和酚類。
   2.攪擾細(xì)菌的酶代謝體系 例如低濃度重金屬鹽、氧化劑與細(xì)菌胞漿中某些酶的-SH基結(jié)合，使酶活性喪失。
   3.損害細(xì)菌細(xì)胞膜 例如外表活性劑、脂溶劑、低濃度酚類等。
(三)影響消毒滅菌作用的要素
   消毒滅菌作用受微生物品種、消毒劑及環(huán)境等多種要素影響。
   1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)刻 同一種消毒劑的濃度愈高，作用時(shí)刻愈長(zhǎng)，滅菌作用愈好。但乙醇以70%擺布的消毒作用**佳。其原因是更高濃度的乙醇使菌體外表蛋白敏捷脫水凝結(jié)，影響乙醇滲入菌體內(nèi)。
   2.細(xì)菌品種 同一消毒劑對(duì)不一樣細(xì)菌的滅菌作用不一樣，是因?yàn)椴灰粯蛹?xì)菌抵消毒劑抵抗力不一樣。細(xì)菌的幼齡菌抵消毒劑比較靈敏。
   3.有機(jī)物及別的要素 細(xì)菌常混合在血清、膿、痰、排泄物中，這些物質(zhì)中的有機(jī)物可阻止消毒劑與細(xì)菌的觸摸，并耗費(fèi)藥品，因此削弱消毒作用。
消毒劑在消毒滅菌進(jìn)程中的溫度、濕度、酸堿度、穿透力、外表張力等要素，都抵消毒滅菌的作用有必定影響。
三、生物要素對(duì)細(xì)菌的影響
   在自然界中，細(xì)菌與細(xì)菌之間，細(xì)菌與動(dòng)植物之間存在著共生和拮抗的聯(lián)系。咱們可以運(yùn)用生物之間的拮抗作用，運(yùn)用某些細(xì)菌的代謝產(chǎn)品、植物成分等按捺或殺滅病原性細(xì)菌，以防治流行癥。
(一)抗生素(antibiotie)
   抗生素是由放線菌、真菌或細(xì)菌等微生物在代謝進(jìn)程中發(fā)生，并能按捺或殺滅別的微生物的有機(jī)化合物。
抗生素的品種許多，有些已能人工組成，其抗菌機(jī)制shou要有以下幾種：
   1.按捺細(xì)胞壁的組成，如青霉素、頭孢霉素、桿菌肽等。
   2.添加細(xì)胞膜的通透性，按捺細(xì)胞膜的運(yùn)輸功用，如制霉菌素、多粘菌素等。
   3.按捺細(xì)菌蛋白質(zhì)的組成，如氯霉素、四環(huán)素、慶大霉素、卡那霉素等。
   4.按捺細(xì)菌核酸的組成，如重生霉素、爭(zhēng)氣霉素等。
   抗生素在臨床上廣泛的使用，在醫(yī)治流行癥上起到了積極作用，但病原菌的耐藥菌株日益增多。從患者標(biāo)本中別離細(xì)菌作藥物靈敏試驗(yàn)，以選用對(duì)致病菌靈敏的抗生素醫(yī)治，是削減耐藥菌株和進(jìn)步抗生素作用的有用措施之一。
(二)噬菌體(bacteriophage)
   噬菌體是寄生于細(xì)菌的病毒，具有必定的形狀構(gòu)造和嚴(yán)厲的寄生性，需在活的易感細(xì)胞內(nèi)增殖，并常將細(xì)菌裂解。
(三)中草藥
   臨床實(shí)踐和試驗(yàn)研討都證實(shí)有許多中草藥有抑菌、滅菌作用，如黃連、黃柏、黃芩、連翹、金銀花等，其不僅對(duì)多種細(xì)菌有抗菌作用，并且對(duì)某些抗生素耐藥菌株也有抗菌作用。
   
   用理化辦法殺死必定物質(zhì)中的微生物的微生物學(xué)根本技能。滅菌的完全程度受滅菌時(shí)刻與滅菌劑強(qiáng)度的制約。微生物對(duì)滅菌劑的抵抗力取決于初始存在的集體密度、菌種或環(huán)境賦予菌種的抵抗力。滅菌是獲得純培育的必要條件，也是食品工業(yè)和醫(yī)藥*域中必需的技能。
 
參考資料：

1. 俞俊棠  生物工藝學(xué)--滅菌

2. 邱樹(shù)毅  生物工藝學(xué)