米曲霉固態(tài)發(fā)酵豆粕制備大豆肽的研究 點(diǎn)擊查看
1 材料與方法
1.1 材料與設(shè)備
1.1.1 材料
米曲霉A-9005:山東大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室提供;
豆粕:山東萬(wàn)得福集團(tuán)生產(chǎn)。
1.1.2 培養(yǎng)基
斜面培養(yǎng)基:米曲霉A-9005 查氏培養(yǎng)基[3];液體活化培養(yǎng)基:米曲霉A-9005 查氏培養(yǎng)基[3];
發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵:水質(zhì)量分?jǐn)?shù)65%,豆粕與麩皮按設(shè)計(jì)比例配制,pH 值5.4~7.0, 取28 g 分裝于250 mL 三角瓶中,121 ℃,20 min 滅菌, 待用。
按10%冷卻接種,于不同溫度下進(jìn)行發(fā)酵。
1.1.3 試劑
濃硫酸,雙氧水,五水硫酸銅,硫酸鉀,硒粉,硼酸,溴甲酚綠,甲基紅,鹽酸,氫氧化鈉,以上試劑均為分析純。
1.1.4 儀器設(shè)備
上海天平儀器廠FA2004 分析天平; 東聯(lián)電子HZQ-Q 振蕩器;北京醫(yī)用LG10-2.4 高速離心機(jī);蘇州凈化SW-CJ-2G 型雙人凈化工作臺(tái); 上海
申安DSX-280AI 型不銹鋼手提式
滅菌鍋;FOSS 分析公司全自動(dòng)凱氏定氮儀; 上海精宏MJPS-150 型霉菌培養(yǎng)箱。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 工藝流程
原料(主要為豆粕)→固態(tài)發(fā)酵→三氯乙酸提
取→大豆肽提取液。
將接菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基放入相對(duì)濕度90%霉菌培養(yǎng)箱,在不同溫度下培養(yǎng)。
取一定量豆粕,按不同比例加入麩皮,調(diào)pH 值**5.4~7.0,發(fā)酵料坯含水率調(diào)節(jié)**65%。經(jīng)滅菌、冷卻,用米曲霉A-9005 接種,選擇不同的發(fā)酵溫度,
發(fā)酵過(guò)程和結(jié)束后測(cè)定發(fā)酵豆粕中酸溶蛋白含量。
1.2.2 提取及計(jì)算方法
稱(chēng)取5 g 樣品(精確**0.0001 g), 加入5 mL10%三氯乙酸溶液,混合均勻,再加入10 mL 5%三氯乙酸溶液, 靜置沉降5 min 后轉(zhuǎn)到離心管中,在4000 r/min 下離心10 min, 取上清液并轉(zhuǎn)到25 mL比色管中定容[4]。
酸溶蛋白測(cè)定:按GB / T 5009.5-2003《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定方法》操作[5-6]。
大豆肽轉(zhuǎn)化率= (酸溶蛋白含量/原豆粕蛋白含量)×100%。